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在淀粉质燃料乙醇生产过程中,酿酒酵母面临的多重胁迫严重制约了燃料乙醇的生产效率。针对这一现状,该文结合国内淀粉质燃料乙醇主要生产工艺,综合分析了该工艺下燃料乙醇发酵过程中影响酿酒酵母生长和生产的各种胁迫因素;阐述了微生物对不同胁迫因子的抗逆分子机制;介绍了菌株耐受性改造的方法;提出实现菌株全局的耐受性和鲁棒性,并且开发基于全基因组的快速进化方法是未来工业微生物耐受性改造的方向。野生酵母菌的最适生长和发酵温度通常在30℃左右,而一般燃料乙醇生产过程中因受到外部环境温度、换热设备和酵母细胞自身代谢反应热量堆积的影响,发酵罐内温度的变化情况为32℃→37℃→35℃→32℃(不加冷冻水控温条件下工厂实测温度),由于地域及季节的影响,有时温度会高达40℃,出现生长的最适宜温度和真实发酵温度不相吻合,温度的变化会影响酵母生长,改变生物酶活,进而影响乙醇产量,夏季尤为严重,
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滚圆机滚弧机国内淀粉质燃料乙醇厂夏季均会因高温而停产5~30d;(2)用于酒精发酵的酵母细胞必须在其适宜的渗透压环境下生长,然而目前的发酵工艺前期高浓度糖液(表1)造成发酵环境渗透压升高,一定条件下致使细胞脱水,细胞结构变形;(3)除了高渗透压对酵母生长与生产的影响,当底物浓度(糖浓度)达一定值时,酵母细胞的生长和代谢受到明显抑制,致使发酵速度下降,当葡萄糖质量分数>5%时,即使有足够的氧存在,也会使酵母细胞的生长速率明显下降(Crabtree效应);(4)发酵后期高浓度乙醇对酵母可能造成有机溶剂胁迫,随着发酵过程的推进,乙醇浓度不断提高,当乙醇体积分数超过10.0%~12.0%后,酵母生长和发酵停止甚至迅速死亡;(5)目前乙醇发酵生产过程,为了避免染菌,发酵初始pH即糖化酶作用最佳酶活条件下pH≈4.3,发酵过程中pH会更低,清液中的不挥发酸,物料和管路中的乳酸菌和醋酸菌产生的杂酸处于pKa以下,会直接对酵母产生胁迫,促使酵母过早死亡,导致生产指标不达标,残糖过高;(6)高浓度的底物及产物使得合成乙醇菌株耐受性改造-电动折弯机数控滚圆机滚弧机张家港电动液压滚圆机滚弧机
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